但由于血-骨髓屏障的存在，骨髓原發(fā)灶中的血藥濃度很難在不產(chǎn)生全身副作用的前提下達(dá)到目標(biāo)濃度，因此當(dāng)前的化療常常遺留微小病灶，導(dǎo)致AML復(fù)發(fā)率高、預(yù)后差，五年生存期僅為30%。因此，將阿霉素等藥物靶向運(yùn)輸?shù)焦撬柚袑?duì)癌變?cè)煅杉?xì)胞進(jìn)行治療十分關(guān)鍵。
另一方面，通過(guò)表面歸巢受體與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面黏附因子相互作用使細(xì)胞回到特點(diǎn)部位的現(xiàn)象叫做“歸巢”，造血干細(xì)胞普遍具有這一特征，即使白血病中發(fā)生癌變的白血病細(xì)胞也仍然保持著歸巢回到骨髓的特質(zhì)。這一特質(zhì)提供了將該種細(xì)胞作為載體，從而實(shí)現(xiàn)藥物突破血-骨髓屏障從而定向輸送到骨髓治療白血病等相關(guān)疾病的可能。為解決這一問(wèn)題，浙江大學(xué)顧臻教授團(tuán)隊(duì)提出利用處理后的無(wú)致病性的AML“死細(xì)胞”構(gòu)建具有骨髓靶向功能的遞藥系統(tǒng)，以提高以阿霉素為代表的化療藥物在骨髓內(nèi)的富集，從而實(shí)現(xiàn)更加有效的對(duì)AML細(xì)胞的抑制。同時(shí)借助AML“死細(xì)胞”本身所攜帶的腫瘤相關(guān)抗原，聯(lián)合免疫佐劑（adjuvant），刺激機(jī)體對(duì)AML癌細(xì)胞的特異性免疫識(shí)別及殺傷。
該策略的關(guān)鍵就是得到無(wú)致病性的AML“死細(xì)胞”。而這一目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)則是在由液氮處理（liquid-nitrogen treated，LNT）“快凍快融”實(shí)現(xiàn)。由此研究人員得到了具有與活細(xì)胞相似結(jié)構(gòu)特征的LNT細(xì)胞。結(jié)合共聚焦顯微鏡，流式等方法，研究人員進(jìn)一步確定了相關(guān)LNT細(xì)胞已經(jīng)喪失生理活性，不具備增殖分化功能，且無(wú)致病性。
那么要將LNT細(xì)胞利用作為遞要載體，一個(gè)重要的方面就是看其“骨髓歸巢”的活性是否保留。通過(guò)對(duì)“骨髓歸巢”相關(guān)重要趨化因子CD44和CXCR4的檢測(cè)以及體內(nèi)LNT細(xì)胞歸巢活性測(cè)量，研究人員確定了制備所得的LNT細(xì)胞歸巢能力被較好的保留，明確了LNT細(xì)胞確實(shí)能作為一個(gè)靶向性遞藥系統(tǒng)。
由此，利用阿霉素與DNA的插層結(jié)合以及其與LNT細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)的相互結(jié)合吸引，研究人員將LNT細(xì)胞與阿霉素共孵育，得到了65 ± 16 μg/1 × 10^7 LNT細(xì)胞的載藥系統(tǒng)（LNT 細(xì)胞/DOX），實(shí)現(xiàn)了骨髓病灶阿霉素的富集。而由于阿霉素與DNA的可逆結(jié)合，這一體系也具有藥物緩釋的特征，使得相關(guān)組織在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)維持較高治療濃度，并且該體系在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中也被證實(shí)能夠抑制腫瘤發(fā)展。
另一方面，癌細(xì)胞碎片可以用來(lái)作為癌癥免疫療法的刺激劑，那么LNT細(xì)胞同樣作為死細(xì)胞，攜帶有AML細(xì)胞相關(guān)癌癥抗原，或許能刺激更強(qiáng)的免疫反應(yīng)，從而聯(lián)合阿霉素等藥物實(shí)現(xiàn)更好的治療效果。研究者對(duì)這一猜想進(jìn)行了測(cè)試。在對(duì)AML小鼠模型進(jìn)行阿霉素，LNT細(xì)胞+免疫佐劑，LNT細(xì)胞/DOX+免疫佐劑，通過(guò)免疫相關(guān)炎性介質(zhì)IFN-γ，ΤΝF-α水平的升高，以及外周中CD3，CD8陽(yáng)性T細(xì)胞數(shù)量的增加，以及相關(guān)小鼠模型的存活現(xiàn)象，研究人員證實(shí)了LNT細(xì)胞能夠與阿霉素一同實(shí)現(xiàn)免疫化療的可能性
此外，研究人員也在體內(nèi)體外驗(yàn)證了利用攜帶AML相關(guān)抗原的LNT細(xì)胞作為疫苗預(yù)防AML發(fā)生的能力。利用該液氮處理方法形成的自身細(xì)胞靶向遞藥系統(tǒng)，具有更好的生物相容性，有望應(yīng)用于其他疾病的治療，為患者帶來(lái)福音。
參考文獻(xiàn)
1. Frederick, C. A.; Williams, L. D.; Ughetto, G.; van der Marel, G. A.; van Boom, H. J.; Rich, A.; Wang, A. H. J. Structural Comparison of Anticancer Drug-DNA Complexes: Adriamycin and Daunomycin. Biochemistry 1990, 29 (10), 2538–2549.
2. Ci, T.; Li, H.; Chen, G.; Wang, Z.; Wang, J.; Abdou, P.; Tu, Y.; Dotti, G.; Gu, Z. Cryo-Shocked Cancer Cells for Targeted Drug Delivery and Vaccination. Sci. Adv. 2020, 6 (50), eabc3013.
110102000668（1）號(hào)